Développement d'une stratégie pour la production hétérologue et l'ingénierie de protéines végétales interagissant avec les lipides
Les protéines de transfert de lipides (LTPs) et les puroindolines sont les principales familles de protéines de l'albumen du blé capables d'interagir avec les lipides. Ces protéines présentent des similarités structurales mais des activités biologiques et technologiques différentes. Pour e...
Enregistré dans:
Auteurs principaux : | , |
---|---|
Collectivités auteurs : | , , |
Format : | Thèse ou mémoire |
Langue : | français |
Titre complet : | Développement d'une stratégie pour la production hétérologue et l'ingénierie de protéines végétales interagissant avec les lipides / Vanessa Lurquin; [sous la dir. de] Didier Marion |
Publié : |
[S.l.] :
[s.n.]
, 2003 |
Description matérielle : | 174 f. |
Condition d'utilisation et de reproduction : | Publication autorisée par le jury |
Note de thèse : | Thèse de doctorat : Biologie : Nantes : 2003 |
Sujets : | |
Documents associés : | Reproduit comme:
Développement d'une stratégie pour la production hétérologue et l'ingénierie de protéines végétales interagissant avec les lipides |
Particularités de l'exemplaire : | BU Sciences, Ex. 1 : Titre temporairement indisponible à la communication BU Sciences, Ex. 2 : Titre temporairement indisponible à la communication |
Résumé : | Les protéines de transfert de lipides (LTPs) et les puroindolines sont les principales familles de protéines de l'albumen du blé capables d'interagir avec les lipides. Ces protéines présentent des similarités structurales mais des activités biologiques et technologiques différentes. Pour explorer cette relation structurale, deux gènes synthétiques ltp et ind spécifiant la LTP1 et la puroindoline A ont été construits et exprimés en fusion traductionnelle avec la thiorédoxine dans le cytoplasme de différentes souches d'E. coli. Les études de structure et d'activité montrent que seule rLTP exprimée dans la souche Origami était identique à la LTP1 de blé. Quant au système d'expression hétérologue de rIND, une méthode de purification des protéines de fusion TRX/IND a été élaborée. Cependant, une stratégie de purification des protéines rIND après clivage reste à définir. La puissance du système mis en place a été testée avec la construction d'une version chimère puroindoline-LTP1. Lipid transfer proteins (LTP) and puroindolines are the major lipid binding proteins from wheat endosperm. These proteins display some structural similarities but different biological and technological activities. To explore this structural relationship, two synthetics genes, encoding wheat LTP1 and puroindoline A, were constructed and expressed as fusion proteins with thioredoxin in the cytoplasm of differents E. coli strains. A purification strategy of rLTPs proteins was developed. Structure-activity studies showed that only the rLTP expressed in Origami strain had similar properties to wheat LTP1. For the rIND expression system, a purification method of fusion proteins TRX/IND was developed but a purification scheme of cleaved proteins should be finalized further. The efficiency of the genetic system was experienced through the construction of a chimeric version of puroindoline and LTP1. |
---|---|
Bibliographie : | Bibliogr. f. 151-174 |