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Élaboration et analyse de molécules inhibitrices de la réparation de l ADN par recombinaison homologue
Les cellules humaines sont soumises à des stress induisant des cassures double-brin de l ADN (CDB). Ces CDB sont réparées notamment par la recombinaison homologue, impliquant les protéines RAD51 et RAD52. Une stratégie thérapeutique émergente est de développer des molécules inhibant RAD51 ou RAD52 a...
| Auteurs principaux : | , , , , |
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| Collectivités auteurs : | , , , |
| Format : | Thèse ou mémoire |
| Langue : | français |
| Titre complet : | Élaboration et analyse de molécules inhibitrices de la réparation de l ADN par recombinaison homologue / Denis Velic; sous la direction de Fabrice Fleury ; co-directeur de thèse Jean-Yves Masson |
| Publié : |
2016 |
| Description matérielle : | 1 vol. (256 p.) |
| Condition d'utilisation et de reproduction : | Publication autorisée par le jury |
| Note de thèse : | Thèse de doctorat : Biochimie, biologie moléculaire Aspects moléculaires et cellulaires : Nantes : 2016 |
| Sujets : | |
| Documents associés : | Reproduit comme:
Élaboration et analyse de molécules inhibitrices de la réparation de l ADN par recombinaison homologue |
| Particularités de l'exemplaire : | BU Sciences, Ex. 1 : Titre temporairement indisponible à la communication |
| Résumé : | Les cellules humaines sont soumises à des stress induisant des cassures double-brin de l ADN (CDB). Ces CDB sont réparées notamment par la recombinaison homologue, impliquant les protéines RAD51 et RAD52. Une stratégie thérapeutique émergente est de développer des molécules inhibant RAD51 ou RAD52 afin d accentuer l instabilité génétique et la mort de la cellule cancéreuse. En effet, dans certains cancers, l activité de RAD51 est dérégulée promouvant la prolifération tumorale. Il existe plusieurs molécules inhibitrices de RAD51 et nous nous sommes intéressés au DIDS dont le mode d action n a pas encore été déterminé. Concernant RAD52, une létalité synthétique a été montrée lorsque celle-ci est inactivée dans des cellules déficientes en BRCA1, BRCA2 ou PALB2, trois gènes mutés dans de nombreux cancers. Récemment, trois types de molécules inhibitrices de RAD52 ont été mis en évidence. Nous avons tout d abord étudié l impact du DIDS ainsi que des molécules dérivées afin de comprendre le mécanisme mis en jeu. Nous avons montré que le DIDS, ainsi que ses dérivés inhibent la liaison de RAD51 à l ADN. Ces molécules empêchent la formation du nucléofilament entrainant une diminution du nombre de foyers RAD51. Nous avons développé une méthode de criblage par fluorescence pour évaluer l effet d une banque de 696 molécules sur la capacité de RAD52 à hybrider deux ADNsb. Deux molécules capables d inhiber la fonction d hybridation de RAD52 ont été mises au jour. In vivo, elles entrainent une diminution de la survie de cellules déficientes en PALB2. La recherche et le développement de nouveaux inhibiteurs de RAD51 et RAD52 constituent des stratégies thérapeutiques d avenir. Human cells are subjected to stress inducing DNA double-strand breaks (DSB). DSB are repaired in particular by homologous recombination, involving RAD51 and RAD52 proteins. An emerging therapeutic strategy is to develop RAD51 or RAD52 inhibitors that promote genetic instability and induce cancer cell death. In some cancers, the activity of RAD51 is deregulated promoting tumor proliferation. There are several RAD51 inhibitors and we focused on DIDS, whose mechanism of action has not been yet determined. Concerning RAD52, a synthetic lethality has been shown when its gene is inactivated in BRCA1, BRCA2 or PALB2 deficient cells, those genes being mutated in various cancers. Recently, three types of molecules inhibiting RAD52 were highlighted. We studied the impact of DIDS and its derivatives to understand the mechanism involved in the inhibition. We showed that DIDS and its derivatives inhibit RAD51 DNA binding function. These molecules prevent the formation of nucleofilament leading to a decrease in RAD51 foci formation. We have developed a fluorescent method of screening to evaluate the effect of a library of 696 molecules on the RAD52 ability to hybridize two ssDNA. Two molecules were able to inhibit the RAD52 hybridization function. In vivo, they induce a decrease in PALB2 deficient cell survival. Research and development of new RAD51 and RAD52 inhibitors represent promising therapeutic strategies. |
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| Variantes de titre : | Elaboration and Analysis of Homologous Recombination DNA Repair Pathway Proteins Inhibiting Drugs |
| Notes : | Ecole(s) Doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé Nantes-Angers (BS 502) Partenaire de recherche : Unité de fonctionnalité et ingénierie des protéines (UFIP) (Nantes) (Laboratoire) Autre(s) contribution(s) : Bernard Lopez (Président du jury) ; Fabrice Fleury (Membre du jury) ; Jacques Huot (Rapporteurs) |
| Bibliographie : | Bibliogr. 51 p. |